Szérumpalack alkalmazása
A szérumpalack alacsony extrakciós boroszilikát üvegből készül, a színtelen átlátszó üveg pedig megfelel az USP Type I és az ASTM E 438 Type I Standard Class A követelményeinek. 121 fokon 20 percig autoklávozható, és 125 ml-re osztható. , 250ml, 500ml, 1L, 2L térfogat szerint.
A szérumpalack egy szérum tárolására szolgáló tartály, amelyet általában PET-anyagból készítenek injekciós feszített fúvással. A tápközeg a sejtnövekedéshez szükséges tápanyag. Forrása szerint szintetikus táptalajra és természetes táptalajra osztják, mindkettő szérumpalackban tárolható.
Szérum palack
Természetes közeg:
A leggyakrabban használt természetes táptalaj a szérum, alapvetően a borjúszérum. A szérum számos sejtnövekedési faktort, adhéziót elősegítő faktort és ezek multiaktív anyagait tartalmazza. Szintetikus tápközeggel kombinálva a sejtek zökkenőmentesen szaporodhatnak és növekedhetnek. A szérumot speciális szérumpalackokban kell tárolni -5 foktól -20 fokig.
Szintetikus közeg:
A szintetikus tápközeget szigorúan a sejtek által igényelt anyagok típusának és mennyiségének megfelelően állítják össze. Számos típus és komponens ismert, ami megkönnyíti a kísérleti körülmények szabályozását. Szénhidrátokat, aminosavakat, lipideket, szervetlen sókat, vitaminokat, nyomelemeket és sejtnövekedési faktorokat tartalmaz. A természetes közeghez képest azonban néhány ismeretlen természetes összetevő nem helyettesíthető ismert kémiai összetevőkkel. Ezért a sejttenyészetben használt alapvető szintetikus tápközegnek bizonyos mennyiségű természetes tápközeg-komponenst is hozzá kell adnia, hogy legyőzze a szintetikus tenyészetet. Nem elegendő a bázis, a leggyakoribb gyakorlat a borjúszérum hozzáadása.
A szérumpalack alakja négyzet alakú, könnyen megfogható, ellenáll a legtöbb sav- és lúgkorróziónak, a ridegedési hőmérséklete -70 fok, és még -30 fokon is van bizonyos szívóssága. Jó csomagolótartály, legyen szó természetes táptalajról vagy szintetikus kultúráról. szérumpalackokban tárolható.
Humán köldökzsinórvér endothel progenitor sejtjeinek izolálására, tenyésztésére és azonosítására, valamint acelluláris vaszkuláris vázak létrehozására javított fagyasztás-olvasztás módszerrel
A humán köldökzsinórvérből izolált és tenyésztett endothel progenitor sejtek megvalósíthatóságának és klinikai alkalmazási értékének feltárása.
Módszerek: A Bengbu Medical College First Affiliated Hospital Szülészeti és Nőgyógyászati Osztályán a teljes időtartamú császármetszésen átesett magzatok köldökzsinórvérét összegyűjtöttük, és 50E/ml heparint tartalmazó szérumpalackba helyeztük. aszeptikus körülmények között, 4 fokos jégszekrényben tárolva, sejtekbe szállítva A tenyésztőszobában sűrűséggradiens centrifugálással nyertük ki a köldökzsinórvér mononukleáris sejteket. A kapott mononukleáris sejteket két részre osztottuk, és borjúmagzati szérum M199 táptalajt (FCS-M199) és autológ szérum M199 táptalajt (AS-M199) adtunk hozzá. Tenyészedényekbe oltották be őket humán fibronektinnel (HFN) vagy anélkül (jelölésük: F(0), F(1), A(0), A(1)). In vitro indukciót, differenciálást és expanziót végeztünk.
Megfigyeltük a tapadó sejtek morfológiai változásait a teljes indukciós és differenciálódási folyamat során, és különböző szögekből azonosítottuk azokat rokon technikákkal, például immunhisztokémiával, immunfluoreszcenciával és áramlási citometriával kombinálva.
Eredmények: 12 napos tenyésztés után a köldökzsinórvér mononukleáris sejtjei elkezdtek tapadni. 3d után kezdett megjelenni az orsó alakja, majd fokozatosan nőtt a tapadó sejtek száma és fokozatosan orsó alakúvá vált. Legfeljebb egy hétig tartó tenyésztéskor egy tipikus kolónia alakult ki orsósejtekkel körülötte és a sejtek közepén. Amikor a sejteket 14 napig tenyésztjük, az egymáshoz kapcsolódó sejtklaszterek fokozatosan összekapcsolódtak, és hálózatszerű struktúrát alkottak. Ugyanakkor a tenyésztési idő folyamatos növekedésével a hosszú orsósejtek is fokozatosan rövidülni kezdtek, és jellegzetes térkőszerű elváltozást mutattak.
A megtapadt sejteket egy hétig tenyésztettük, és megfigyeltük, hogy a humán fibronektint tartalmazó tápközegben a sejtek száma szignifikánsan magasabb volt, mint a humán fibronektin nélküli tápközegben, és nem volt szignifikáns változás a sejtek számában a két különböző tápközegben. #Műszer fogyóeszközök#