A vírusfertőzések okozta betegségeknél a kezelendő vírustípusok tisztázása érdekében az alábbi két típusú vizsgálat végezhető:
1. Magának a vírusnak a közvetlen kimutatása
2. Ki tudja mutatni a vírus felszínén lévő antigént és a vírus nukleinsavát.
A teszt azonosította a vírussal szemben termelődő antitesteket:
Normál körülmények között az antigénvizsgálat nem igényel magas laboratóriumi körülményeket, és elsősorban az elsődleges kórházakban történő nagyszabású szűrésre alkalmas; Az antitest-vizsgálat egyszerűen végrehajtható, a teszteredmények 10-15 perc alatt elérhetők. A nukleinsav kimutatásához sok laboratóriumi körülményre, időszakos személyzetre és berendezésekre van szükség, de az eredményoldal a legérzékenyebb és legpontosabb.
A 10 jóváhagyott új koronavírus-nukleinsav-detektáló reagens közül 8 mindegyik fluoreszcens PCR módszert alkalmaz, a fennmaradó kimutatási módszerek pedig a kombinált szondával rögzített polimerizációs szekvenálási módszer és az állandó hőmérsékletű amplifikációs chip módszer.
1. Fluoreszcencia PCR módszer
A PCR módszer a polimeráz láncreakcióra utal, amely nagymértékben növelheti a DNS nyomnyi mennyiségét. Ha az új koronavírus kimutatására használják, mivel az új koronavírus egy RNS-vírus, szükséges a vírus RNS-ének reverz transzkripciója DNS-vé a PCR kimutatás végrehajtása előtt.
A fluoreszcens PCR detektálás elve az, hogy a PCR előrehaladtával a reakciótermékek tovább halmozódnak, és ezzel arányosan nő a fluoreszcens jel intenzitása is. Végül a termék mennyiségének változását a fluoreszcencia intenzitás változásával követjük nyomon, ezáltal fluoreszcens amplifikációs görbét kapunk.
Jelenleg ez a leggyakrabban használt módszer az új koronavírus nukleinsav kimutatására. A következő tényezők azonban hibákat okozhatnak a teszteredményekben:
Nem megfelelő tárolás vagy vizsgálatra való benyújtás elmulasztása: Az RNS-vírusok könnyen lebomlanak. Ezért a betegminták beszerzése után azokat szabványosított módon kell tárolni, és a lehető leghamarabb tesztelni kell. Ellenkező esetben a teszt eredménye valószínűleg pontatlan.
Az eredmények hibás értelmezése: A jelenleg jóváhagyott teszttermékek kiválasztása az új koronavírus genom nyitott 1a/b leolvasási kerete, burokfehérje és nukleokapszid fehérje alapján történik. A különböző termékek detektálási primerei és szondatervei azonban eltérőek, és különbségek vannak az egycélú szegmensek, a kettős célszegmensek és a három célszegmensek észlelésében és értelmezésében. Ezért ha az értelmezést nem szigorúan a különböző utasításoknak megfelelően hajtják végre, az az eredmény téves megítéléséhez vezethet.
2. Kombinált szondával rögzített polimerizációs szekvenálási módszer
Ez a kimutatás főként a szekvenáló tárgylemezen lévő DNS-nanogömbök által hordozott génszekvencia kimutatására szolgáló speciális műszer segítségével történik.
Ez a fajta észlelés nagy érzékenységű, és nem könnyű kihagyni a diagnózist, de az eredményeket számos tényező is könnyen befolyásolja, többek között:
Időben nem vizsgált minták: A fluoreszcens PCR-módszerhez hasonlóan az eredmények pontatlanok lehetnek, ha nem tárolják őket szabványos módon és a lehető leghamarabb tesztelik.
A vizsgálati hely szobahőmérséklete túl magas: Ez szintén befolyásolja a vizsgálati eredmények pontosságát. A különböző vizsgálóeszközök és készletek szintén befolyásolhatják az eredményeket.
3. Állandó hőmérsékletű amplifikációs chip módszer
A génchip kimutatása a hagyományos virológiai diagnosztikai módszerek egyike. A detektálási elv a nukleinsavak komplementer kötési jellemzői alapján kifejlesztett kimutatási módszer, amely felhasználható a szervezetekben jelenlévő nukleinsavak minőségi vagy mennyiségi mérésére. A PCR-hez képest a génchip nagyobb pontossággal és rövidebb idővel rendelkezik, ugyanakkor drágább és a detektálási teljesítmény (az egységnyi idő alatt generálható adatmennyiség) is viszonylag alacsonyabb.
Az ezúttal jóváhagyott termosztát chip hatféle légúti vírust képes kimutatni, köztük az új koronavírust is. Az eredmény 1,5 órán belül elérhető,
A PCR-hez képest a génchip pontossága és ideje rövidebb, de az ára drágább, és a detektálási teljesítmény (az egységnyi idő alatt generálható adatmennyiség) viszonylag alacsonyabb.
4. Vírusellenanyag kimutatása
Az antitest-detektáló reagenseket az emberi szervezet által termelt IgM vagy IgG antitestek kimutatására használják, miután a vírus bejutott az emberi szervezetbe. Az IgM antitestek korábban, az IgG antitestek pedig később jelennek meg.
A jelenleg jóváhagyott öt új koronavírus-ellenanyag-detektáló reagens az aranykolloid módszert és a mágneses részecske kemilumineszcenciás módszerét használja.
5. Kolloid arany módszer
Az aranykolloid módszernél kolloid arany tesztpapírt használnak a teszteléshez, amely a jelenleg gyakran emlegetett gyorsteszt papír.
Ez a fajta tesztpapír speciális jelöléssel és lyukakkal van ellátva, amely a vizsgázó szérummintájának csepegtetésére szolgál. A kolloid arany tesztpapíron két vonal található, az egyiket tesztvonalnak, a másikat minőségellenőrző vonalnak hívják. Ha mindkét vonal színes, az pozitívat jelent; csak a minőségellenőrzési vonal színes, ami negatívat jelent; e két eset kivételével az Érvénytelen eredményhez tartozik.
