A mondás szerint, ha a munkás jó munkát akar végezni, először meg kell élesítenie a szerszámait. A fogyóeszközök kiválasztása nagyon fontos a kielégítő PCR kísérleti eredmények eléréséhez. A PCR eredmények elemzésekor gyakran a primerek, az enzimkoncentráció, a hőmérséklet és az idő elemzésére koncentrálunk, de figyelmen kívül hagyjuk, hogy a PCR fogyóeszközök is az egyik befolyásoló tényező. Sokféle PCR fogyóeszköz létezik, hogyan válasszuk ki a megfelelő PCR fogyóeszközöket? Íme néhány kérdés, amelyek segítenek megtalálni a választ.
pcr fogyóeszközök
1. Miért készülnek a PCR fogyóeszközök általában PP-ből?
Legyen szó közönséges PCR-ről vagy valós idejű fluoreszcens kvantitatív PCR-ről (qPCR), általában a fogyóeszközök közvetlenül érintkeznek reagensekkel vagy mintákkal, így a gyártási és előkészítési folyamat során jó minőségű anyagokra és jó feldolgozási technikákra van szükség. Az általános fogyóeszközök polipropilénből (PP) készülnek. A polipropilén (PP) biológiailag inert anyag, a felület nem könnyen tapad a biomolekulákhoz, jó a vegyszerállósága és a hőmérséklettűrése.
2. Hogyan válasszunk különböző térfogatú PCR csöveket/lemezeket?
A PCR-csövek/lemezek általános térfogatai:
• Egycsöves/{{0}}cső/12-cső: 0.5mL, 0.2mL, 0.1mL
• {{0}}lyuklemez: 0,2 ml, 0,1 ml
• {{0}}lyuklemez: 0,02 ml
PCR-csövek/lemezek specifikációi:
Válassza ki a megfelelő terméket az adott kísérleti követelményeknek megfelelően. A legtöbb PCR-cső térfogata megfelel a PCR-reakciók követelményeinek. A kapacitásspecifikációk standard kapacitással és alacsony kapacitással érhetők el. Általában ajánlott először kis kapacitású csöveket választani. Mivel a kis térfogatú reaktorcsövek/tányérok kisebb belmagassággal rendelkeznek, javul a hőátadás és csökken a párolgás. Ugyanakkor a minták hozzáadásakor kerülni kell a túl sok vagy túl kevés minta hozzáadását. A túl sok csökkent hővezetőképességhez, kiömléshez és keresztszennyeződéshez vezethet, míg a túl kevés minta párolgási veszteséget okozhat.
3. Mi a különbség az egycsöves vagy a 8-soros cső lapos/domború fedele között?
Ha a minta térfogata kicsi, az egycsöves vagy {{0}}csöves csöveket részesítsük előnyben. Ha azonban nagy a reakciótérfogat-igény, akkor az egycsövek dominálnak, és a térfogat elérheti a 0,5 ml-t. Kétféle egycsöves és 8-csöves cső van lapos és domború fedővel, mindegyiknek megvannak a maga előnyei. A lapos kupak pontos fluoreszcens jelátvitelt biztosít a qPCR-hez; könnyen írható jelzőkre. A konvex burkolat érintkezik a PCR műszer fedelével, hogy csökkentse a nyomás okozta csődeformációt; azonban hatással lesz a fluoreszcens jelek átvitelére, és nem alkalmazható qPCR-kísérletekben.
4. Milyen különbségek vannak a különböző 96-kútlemezek felhasználási forgatókönyvei között?
96-A mélyedéses tányérokat általában nem szegélyezett tányérokra, félig szegélyezett tányérokra és teljesen szegélyezett lemezekre osztják.
Szoknya nélküli lemezek: Kompatibilis a legtöbb hősugárzóval vagy qPCR géppel, de nem alkalmas automatizált alkalmazásokhoz. A stabilitás nem magas a pipettázási folyamat során, ezért lemeztartóval kell használni.
Félszoknya lemez: Alkalmazható vonalkód címkézésére vagy felvitelére, valamint automatikus felvitelre, és jó pipettázási stabilitást biztosít.
Teljes szoknyalemez: kiválóan alkalmas automatizált laboratóriumi alkalmazásokhoz, de alkalmas címkék és vonalkód alkalmazásokhoz is. Jó mechanikai szilárdság, alkalmas kiálló modulokkal rendelkező PCR gépekhez, és nagy stabilitás a pipettázás során.
5. A PCR lemez/cső anyaga vastagabb és stabilabb?
nem. A PCR fogyóeszközöknek egyenletes falvastagságúaknak kell lenniük, hogy egyenletes hőátadást biztosítsanak. Az ultravékony csőfal 50 százalékkal vékonyabb, mint a standard változat, ami tovább csökkentheti a hőzárót, ami gyorsabb és jobb reakciót eredményez.
6. A 96-kút vagy 384-kútlemezek esetében miért nem azonosak a vágott sarkok és a címkék?
Sarokvágás: A PCR lemez sarokvágási pozíciójának megválasztása az adaptált műszer követelményeitől függ a könnyű pozicionálás érdekében.
Azonosítás: A PCR-lemezeken található alfanumerikus jelölések segítik az egyes lyukak és a mintahelyek azonosítását. Általában ez egy emelt színes embléma vagy egy gravírozott logó. Egyes automatizált alkalmazási kísérleteknél a nyomott jelzésekkel ellátott reakciólemez jobban lezárható.
7. Néhány PCR lemez lyuk kiálló, míg mások laposak. Melyik a jobb?
Ami alkalmas, az jó. Az elterjedt PCR lemezeknek két típusa van: lapos lyukélek és megemelt lyukélek. Reakciólemez lapos kútperemekkel, alkalmas a legtöbb termikus ciklushoz. A felszálló furat szélén található reakciólemez kényelmes a tömítéshez, ami csökkentheti a minták közötti keresztszennyeződés kockázatát.
8. Hogyan válasszunk különböző színű PCR csöveket/lemezeket?
A szokásos PCR-reakciókhoz transzparensek használhatók. A valós idejű PCR reakcióban a fehér cső érzékenysége és konzisztenciája viszonylag magasabb. A fehér csőfalak megakadályozzák a fluoreszcencia áthaladását a csőfalakon és a fénytörést, ezáltal megakadályozzák, hogy a fluoreszcencia átjusson a fűtőmodulba, elnyelje a modul, vagy következetlenül tükröződjön. Az átlátszó csövekhez képest erősebb és fókuszáltabb fluoreszcenciajelek gyűjthetők a fehér csövek tetején.
