A sejtszennyeződés elkerülésének módjai: Pipettázási tippek, amelyeket tudnia kell
A sejttenyészetben szabályozott számos változó közül egy konkrét változó befolyásolja az egész kísérletet: a szennyeződés. A sejtszennyeződés egyik hozzájáruló tényezője nem mindig van a radaron, és bár csendesen befolyásolhatja a sejtek egészségét és befolyásolhatja a mérési adatokat, a pipettával történő szennyeződés.
A pipetták, pipettahegyek és pipettázási programok kiválasztása kevés figyelmet kap a kísérletek tervezése során. Előfordulhat, hogy még a pipettával történő szennyeződés elkerülésére szolgáló takaró oldat (autoklávozás) sem olyan hatékony, mint azt általában hiszik.
A sejttenyésztés első szabálya: kerülje a szennyeződést. Miért olyan fontos a steril technika a sikeres sejttenyésztéshez?
Az aszeptikus technika az egyetlen módja a megbízható és reprodukálható eredmények elérésének. A szennyezés hatással lehet a sejtnövekedésre, az anyagcserére és az egészségre, -- amit a tudósok szeretnek tanulmányozni. A szennyezett sejtvonalak nem rendelkeznek a kívánt tulajdonságokkal, és a szennyeződés súlyosságától függően minden alkalommal másként működnek. Ezenkívül, ha a szennyeződések túlszaporítják az érdeklődésre számot tartó sejtjeit, előfordulhat, hogy rossz szervezetet tanulmányozhat.
Milyen típusú szennyező anyagokkal találkoznak gyakran a tudósok?
A szennyeződés gyakori forrásai a baktériumok, élesztőgombák és penészgombák. A sejttenyésztési munkában a legnehezebben kimutatható és felszámolható a mikoplazma. A kevésbé gyakori szennyeződések közé tartozik például a laboratóriumi fogyóeszközökben lévő műanyag kilúgozó anyagok.
Melyek a sejtszennyeződés leggyakoribb okai?
A szennyeződés gyakori forrása a rossz pipettázás, például a szennyezett pipetták és a nem szűrőhegyek használata. Ezen túlmenően a helyes laboratóriumi gyakorlatok hiánya is probléma, mint például az olyan műszerek, mint az inkubátorok vagy a lamináris áramlási szekrények nem megfelelő fertőtlenítése. A mikoplazma eltávolításához 0,1 µm-es szűrővel kell szűrni a 0,2 µm-es szűrő helyett.
Három pipettázási szennyeződés:
1. Pipetta-minta szennyeződés: A pipetta vagy pipetta hegye szennyezi a mintát.
Hogyan kerüljük el:
Használjon steril szűrőhegyeket, hogy elkerülje a pipetta testének szennyeződését.
Cserélje ki a pipetta hegyét minden minta után.
Rendszeresen autoklávozza vagy sterilizálja a pipettákat etanollal. Válasszon egy autokláv-kompatibilis pipettát.
2. Minta-pipetta szennyeződés: Ha a mintát a pipettatestbe pipettázzuk, az szennyezi a pipettát.
Hogyan kerüljük el:
Használjon szűrőhegyeket vagy pozitív elmozdulású hegyeket, hogy megakadályozza a minták bejutását a pipetta testébe.
Pipettázáskor tartsa a pipettát függőleges helyzetben. A pipettát függőlegesen tárolja.
Pipettázás közben döntse meg az üveget.
Lassan engedje el a gombot, nehogy a minta a pipettába fröccsenjen. Válasszon puha kilökő funkcióval ellátott pipettát.
3. A minták közötti szennyeződés: A maradék pipettázási mintákat átvisszük a következő mintába. Általában akkor fordul elő, ha ugyanazt a hegyet többször használják.
Hogyan kerüljük el:
Cserélje ki a pipetta hegyét minden minta után.
Használjon szűrőhegyeket vagy pozitív elmozdulású hegyeket, hogy megakadályozza a minta bejutását a pipettatestbe és a következő mintára.
A minta szivárgásának elkerülése érdekében ügyeljen arra, hogy a pipetta hegye tömített legyen a pipettán. Például a Yongyue Medical csúcsa.
Vannak olyan szennyező tényezők, amelyekről a tudósok nem is tudnak?
Az autoklávozás hatékonyságát gyakran nem igazolják, és ha az autokláv nem működik megfelelően, előfordulhat, hogy az autoklávozott pipettahegyek nem sterilek. A védőcsomagolásba csomagolt elősterilizált szűrők jelentik a legbiztonságosabb megoldást az ilyen balesetek megelőzésére. A kiváló minőségű pipettahegyek elősterilizálási folyamatát rendszeresen validálják az elősterilizálás hatékonyságának biztosítása érdekében.
Hogyan könnyítik meg a pipettázó és adagoló eszközök a tudósok számára a minták steril környezetben történő kezelését?
A megfelelő pipetták és pipettahegyek kiválasztása megkönnyítheti az aszeptikus munkafolyamatot. A Yongyue orvosi pipetták könnyen tisztíthatók és szerszám nélkül nyithatók, felgyorsítva a napi tisztítást. Mivel az autoklávozás hatékonyabban távolítja el a szennyeződéseket, mint az etanolos törlőkendők, a Sartorius mechanikus pipetták teljesen autoklávozhatók, ami azt jelenti, hogy a pipettáit megbízhatóan fertőtlenítheti. A puha hegy kilökődése megakadályozza a szennyeződés kifröccsenésének kockázatát a hegy kilökésekor. Az előre sterilizált szűrőhegyek védik a mintákat a keresztszennyeződéstől. A Yongyue orvosi tippeket szintén szivárgásmentes csomagolásba csomagolják, ami azt jelenti, hogy a tárolási és szállítási körülmények között semmilyen szennyeződés nem érintkezik a hegyekkel vagy a hegyes dobozzal.
Hogyan kerülhetik el a tudósok a környezetszennyezést? Mik a legjobb tippjei a steril munkához?
Először is a helyes laboratóriumi gyakorlat és a munkalépések gondos tervezése. Ügyeljen arra, hogy csak azt tartsa a lamináris áramlási szekrényben, ami egy adott munkafolyamathoz szükséges, és egyidejűleg egy sejttenyészetet használjon. Ráadásul a szennyeződések, például a mikoplazma rendszeres vizsgálata nyugalmat és magabiztosságot ad az eredményekben. Steril körülmények között végzett munka esetén az elősterilizált szűrőhegyekre és steril reagensekre költött pénz megéri a pénzt.
