Mi a PCR nukleinsav kimutatás jelentése, módszerei és lépései?
A nukleinsavteszt jelenleg hatékony módszer annak meghatározására, hogy a vírus hordozza-e az új koronavírust. Jelenleg az emberek főként orr-, toroktamponokat és antitestszérum-lgm-t használnak referenciaként. De a legújabb szingapúri belépési követelmények szerint PCR-nukleinsav-tesztet végeznek, tehát mit jelent a PCR-nukleinsav-teszt?
Mit jelent a PCR nukleinsav kimutatás?
A PCR polimeráz láncreakciót jelent, amely felhasználható DNS amplifikálására, hogy kis mennyiségű DNS-t amplifikáljon a kimutatható mértékben. Egyes vírusok nukleinsava DNS, és ezt a módszert kell használni a kimutatáshoz. Ezért a PCR nem egy elvégzett ellenőrzés, hanem egy módszer a DNS kimutatására. Például a hepatitis B vírus DNS mennyiségi meghatározása ezt a módszert használja. A DNS-vizsgálat célja egyrészt a betegség diagnosztizálása. Ha még a kórokozó DNS-e is kimutatható, az azt jelenti, hogy a kórokozó fertőzött; másrészt annak megítélése, hogy a vírus mennyit replikált, hogy megítélje a betegség súlyosságát vagy a kezelés hatását.
PCR nukleinsav kimutatási módszerek és lépések
A nukleinsav-teszt öt lépést igényel: mintavétel, minta-visszatartás, retenció, nukleinsav-kivonás és számítógépes tesztelés.
A nukleinsav kimutatás első lépése az emberi váladék összegyűjtése, valamint a garat orrüregének vagy hátsó falának, valamint a kétoldali garatmandulák orr- vagy garatteszttel történő áttörlése.
A második lépésben az egészségügyi személyzet megtartotta a mintát, a próbadarab fejét a sejtkonzerváló oldatba merítette, majd a faroktörés után azonnal felcsavarta a cső kupakját.
A harmadik részben a mintát légmentesen záródó zacskóba helyezzük, megőrizzük, és időben küldjük ellenőrzésre.
A negyedik lépésben a mintát el kell küldeni a laboratóriumba nukleinsav kinyerésére.
Az ötödik lépésben az extraktumot fluoreszcens PCR-amplifikációs reakciónak vetjük alá.
Mi az a nukleinsav
A nukleinsav (nukleinsav) egyfajta biológiai makromolekula, amely nukleotidokból (nukleotidokból) áll, ribonukleinsavra (RNS) és dezoxiribonukleinsavra (DNS) osztva, amelyben az RNS többnyire egyláncú, a DNS többnyire kétszálú szerkezet. A prion mellett a nukleinsav az élethez szükséges biológiai makromolekula. Fő feladata, hogy az élet genetikai információhordozóját képezze. Ezenkívül egyes nukleinsavak felhasználhatók biológiailag aktív enzimek képződésében, és részt vehetnek abban. Molekulák vagy más molekuláris gépek.
Mi az a nukleinsav vizsgálat
A nukleinsav-detektálás, ahogy a neve is sugallja, a nukleinsavak kimutatását jelenti.
Melyek a nukleinsavteszt egyedülálló előnyei? Miért használható"gold standard" az új koronavírus diagnosztizálására?
Valójában minden észlelési módszernek megvannak a saját alkalmazási forgatókönyvei. Példaként említve a vírusdetektálást, a szokásos immunológiai kimutatási módszerek (kolloid arany, ELISA, kemilumineszcencia stb.) kimutatási tárgya a vírus antigénje vagy antiteste, amely ekvivalens"side rajz". Mivel a fertőzéstől a kimutathatóságig időablak van, az immunológiai kimutatási módszerek általában nem alkalmasak a korai diagnózisra.
Mi a PCR nukleinsav kimutatás jelentése, módszerei és lépései?
Hamis pozitív és hamis negatívumok
1. Hamis pozitív
Általában kevesebb a hamis pozitív eredmény. Általában a laboratóriumi személyzet nem megfelelő működése a minták közötti keresztszennyeződéshez vagy az amplifikált termékek maradék szennyeződéséhez vezethet. Ebben az esetben téves pozitív eredményeket okozhat.
A hamis pozitívumok azonban hatékonyan megkerülhetők az észlelési folyamat szigorú ellenőrzésével és egy olyan stratégia megvalósításával, amely véletlenszerűen vesz részt több negatív minta kimutatásában.
2. Hamis negatív
Amit itt meg kell magyarázni, az az, hogy a PCR-detektálásban a fals negatívok és a klinikai hamis negatívok valójában nem ugyanaz a fogalom.
Az interneten hevesen vitatott új koronavírus diagnózisának példájaként a klinikai hamis negatívok olyan esetekre utalnak, amikor a klinikai tünetek és a képalkotó vizsgálatok erősen gyanús fertőzöttséggel, de a PCR-teszt ismétlődően vagy mindig negatív; és a PCR teszt álnegatív az összegyűjtöttre utal. Elegendő mennyiségű új koronavírus van a mintában, de nem mutatták ki.
Az álnegatívok elkerülése érdekében a nukleinsav-tesztben a főbb megoldási igények a következők: (1) elegendő vírus van a fertőzött személy sejtjeiben, (2) a vírust tartalmazó sejtek gyűjthetők a begyűjtött mintában, és (3) ) a mintában lévő vírus észlelve Ez a három link.
Közülük a PCR-készletek műszaki paraméterei elsősorban a harmadik detektálási kapcsolatot érintik.
Csak a harmadik tesztlink esetében, ha a mintában lévő vírusok száma egy bizonyos szint alatt van (a minimális kimutatási határ alatt), a PCR kit nem tudja kimutatni. Ebből a szempontból a PCR-detektálás hamis negatívjait nem lehet teljesen elkerülni. Éppen ezért szükséges a vírusspecifikus antitest-vizsgálat fejlesztésének kiegészítése.
