Működési módszereink, részleteink és elméleti magyarázataink lesznek az Ön működésének iránymutatásai, mint például a tápoldatok és sejtlombikok elhelyezése; sterilizációs eljárások; Ahhoz, hogy megtanuljuk helyes működésüket, már első alkalommal oda kell figyelni rájuk.
A sejtek ápolása, mint a gyermeknevelés
A sejtek valóban törékenyek. A legjobb, ha minden nap ellenőrizzük, hogy megelőzzük az olyan rendellenes jelenségeket, mint a vízhiány, a szén-dioxid, az áramkimaradás és az elégtelen hőmérséklet az inkubátorban. Ezeket a baleseteket is időben meg kell oldani, hogy elkerüljük az ismételt kísérletek okozta nagyobb fájdalmat. .
A jó sejteket időben be kell vetni
A sejteket kötegekben passzálják, így még ha az egyik köteg meghibásodik, marad egy tartalék. Lehet, hogy az utóbbihoz hasonló átlagembernek nem lesz könnyű dolga. De ez a vérem leckéje. Miután a cellák beszennyeződtek, az egész hadsereget kiirtották. Akkoriban bántam, hogy nem védtem meg a magot.
Minden sejtnek megvannak a sajátosságai, és másképp kell kezelni őket.
A sejtek ugyanazok, mint az emberek, és a különböző sejtek eltérő tenyésztési jellemzőkkel rendelkeznek. Legyen óvatos a termesztési folyamat során. A különböző sejtvonalak különböző tápközeget és szérumot használnak.
Például az általam nevelt simaizomsejtek nagyon aktívak és szeretnek élénkek lenni. 2-3 nap múlva sok lesz a lakosság, és nem szeretek sokat enni és inni. Tényleg a legjobb gyereket nevelni. Az endotélsejtek és a simaizomsejtek hasonló személyiséggel rendelkeznek, de nagyon nem higiénikusak és hanyagak. Sok szekréciós sejt található bennük, ezért gyakran cserélni és mosni kell őket. A RAW264.7 sejtek is nagyon vidámak és nagyon ehetők. Gyakran kell etetni őket. A fejfájás az, hogy a sejtek könnyen aktiválódnak. Még jó, hogy endotoxinoktól mentes a palack és a környezet, amelyben tenyésztik, de anyaként nehezen tudom ezeket kielégíteni.
Felkészülés a munkára edzés előtt
Beleértve a fogyóeszközök kezelését, a reagensek konfigurációját, a sterilitás vizsgálatát stb.
Üvegtárgyak tisztítása. Üvegtárgyaknál (sejtüveg, tápoldatot tartalmazó palack, kis penicillin flakon stb.) először mosóport használjunk a tisztításhoz (ügyeljünk az elhalt sarkokra), majd öblítsük le. 24 óránál hosszabb ideig áztassa savas oldatban, majd 10-szer öblítse le tiszta vízzel, hogy eltávolítsa a maradék savoldatot. A palackokat stb. öblítés közben erőteljesen rázza fel. Ezután kétszer desztillált vízbe áztatjuk 24 órán át. Száradás után csomagolja be és szárítsa 160 fokon 2 órán keresztül.
Reagens konfiguráció. Sejttenyésztéshez folyadékként általában több mint kétszer desztillált víz használható. És figyeljen a pH érték beállítására.
Sterilitás vizsgálat. Főleg szűrős sterilizálást használnak: például tripszin, antibiotikumok, G-418 oldat, különféle táptalajok, nátrium-piruvát, glutamin stb. Néhányan autoklávozhatók: PBS, D-Hank, stb.
A reagenseket alikvot részekben tároljuk
Beleértve a tápoldatot, a pankreatint, a szérumot stb.
A szérum különösen fontos. A szérumot -20 fokon kell tárolni. Ha egy palackot nem lehet egyszerre felhasználni, akkor 40-50ml-t steril, savval kezelt palackokba tölthet, vagy akár penicillin palackokban is tárolható. Általában a gyártó által biztosított szérum steril, és nem igényel steril szűrést. Ha sok lebegő anyagot találunk a szérumban, akkor a szérum hozzáadható a táptalajhoz és együtt szűrhető, és a szérumot nem szabad közvetlenül szűrni. (Normál körülmények között nincs hatással a sejttenyészetre)
A palackozott szérumot fokozatosan kell felolvasztani: a 4 fokos hűtőszekrényt teljesen feloldjuk, majd kicsomagoljuk. Az oldódási folyamat során rendszeresen fel kell rázni (vigyázni kell, nehogy légbuborékok keletkezzenek), hogy a hőmérséklet és az összetétel egységes legyen, és csökkenjen a csapadék előfordulása. Közvetlenül –20 fokról 37 fokra nem szabad felolvasztani, mert a hőmérséklet túlságosan megváltozik, ami könnyen fehérje koagulációt és kicsapódást okozhat.
A hőinaktiválás a teljesen felolvasztott szérum melegítését jelenti 56 fokon 30 percig. Miután a vízfürdő 56 fokra emelkedett, tegye bele a szérumot, várja meg, amíg a hőmérséklet 56 fokra emelkedik, és számolja az időt, általában 5 percenként rázzuk fel egyenletesen. Ennek a hőkezelésnek az a célja, hogy deaktiválja a szérum komplement komponenseit. Hacsak nem szükséges, ezt a hőkezelést általában nem hajtják végre, mert jelentős üledéknövekedést okoz, és befolyásolja a szérum minőségét. Ügyeljen a szérum cseréjének (beleértve a különböző tételeket is) sejtekre gyakorolt hatására.
Erős sterilitásérzet
A kísérlet előtt az ultra-tiszta munkapadot 30 percig UV-fénnyel sterilizáltuk, az aszeptikus munkafelületet 70 százalékos etanollal áttöröltük, és a kísérleti művelet megkezdése előtt néhány percre bekapcsoltuk az ultra-tiszta asztali ventilátort. .
Ha többet szeretne megtudni a laboratóriumi sejttenyésztésről, kattintson a következő címre: http://www.shjasw.com/
